Кривая осмотической устойчивости эритроцитов

Осмотическая резистентность эритроцитов

Кривая осмотической устойчивости эритроцитов

Под резистентностью эритроцитов понимают их устойчивость к различным разрушающим факторам: механическим, тепловым и другим.

Особое значение в лабораторных исследованиях имеет осмотическая резистентность эритроцитов, то есть устойчивость к гипотоническим растворам NaCl разной концентрации.

С помощью специального теста определяют, при какой концентрации хлорида натрия начинается распад красных кровяных телец (гемолиз).

Эритроциты для нормального функционирования должны сопротивляться осмотическому давлению, то есть должны быть прочными. Способность к сопротивлению и называется осмотической устойчивостью, или резистентностью. Если красные тельца становятся слабыми, иммунная система их маркирует как отработанный материал и удаляет из организма.

Выделяют резистентность максимальную и минимальную. Максимальная соответствует концентрации гипотонического раствора NaCl, при которой в течение 3-х часов происходит гемолиз всех красных клеток. Минимальная определятся концентрацией раствора, при которой разрушаются наименее устойчивые эритроциты.

Что такое физраствор?

Физраствор – это дистиллированная вода с растворенной в ней поваренной солью. Физиологический раствор с концентрацией 0,85 процентов называют изотоническим. В нем разрушения эритроцитов не происходит.

Если концентрация соли ниже, раствор называют гипотоническим, если выше – гипертоническим. При помещении в такие растворы эритроциты начинают разрушаться. В гипертоническом, или гиперосмотическом, они теряют воду и сморщиваются. В гипотоническом, или гипоосмотическом, они поглощают воду и набухают.

Как проводится анализ?

Чтобы провести пробы на осмотическую резистентность эритроцитов, в пробирки помещают гипотонический раствор NaCl разной концентрации (от 0,7 % до 0,22%). В каждую пробирку добавляют одинаковое количество крови, как правило – 0, 02 мл.

В течение часа держат при комнатной температуре, после чего центрифугируют и по цвету раствора определяют начало разрушения эритроцитов и полный гемолиз. Если раствор слегка порозовел, это говорит о начале разрушения.

При полном распаде раствор приобретает ярко-красный цвет.

В результате получают два параметра – максимальную и минимальную резистентность, которая выражается в процентах.

Советуем прочитать:Сколько живут эритроциты?

Норма

Для взрослых людей нормой считается:

  • максимальная резистентность – от 0,34% до 0,32%;
  • минимальная – от 0,48% до 0,46%.

У детей до двух лет осмотическая устойчивость в норме выше, чем у более старших. У пожилых людей – немного ниже нормы.

Причины отклонения от нормы

Причин отклонения от нормы много. Максимальная резистентность (ниже 0,32%) наблюдается при:

  • талассемии;
  • некоторых случаях полицитемии;
  • гемоглобинопатии;
  • спленэктомии;
  • массивных кровотечениях;
  • застойной желтухе;
  • гемоглобинозе;
  • атеросклерозе;
  • злокачественных опухолях ЖКТ.

Поведение эритроцитов в гипертоническом, изотоническом и гипотоническом растворе

Минимальная осмотическая стойкость (выше 0,48%) связана:

  • с гемолитической анемией новорожденных;
  • с отравлением свинцом;
  • с гемолитической анемией наследственной.

Незначительное снижение может происходить при следующих состояниях:

  • туберкулезе;
  • лейкозе;
  • циррозе печени;
  • некоторых случаях полицитемии.

К причинам снижения осмотической резистентности также можно отнести:

  • присутствие в крови шарообразных эритроцитов, что обусловлено генетически;
  • сердечную недостаточность, при которой красные клетки набухают, принимают сферическую форму, что сокращает их продолжительность жизни;
  • старение эритроцитов, завершающий этап их жизни, во время которого они приобретают шарообразную форму, при этом проницаемость их стенок значительно увеличивается.

Признаки нарушения осмотической устойчивости

Симптомы такого отклонения бывают следующими:

  • повышение температуры тела, иногда до высоких значений;
  • быстрая утомляемость;
  • плохой аппетит;
  • общая слабость;
  • бледность слизистых оболочек;
  • снижение веса;
  • сонливость.

Сфероциты (шарообразные эритроциты) менее устойчивы к осмотическому давлению

Зависимость резистентности от формы и зрелости эритроцита

Осмотическая стойкость зависит от формы и возраста клеток. В норме эритроциты имеют невысокий индекс сферичности, но в крови могут присутствовать элементы шарообразной формы, которые отличаются более низкой устойчивостью к разрушению.

При такой форме значительно снижается резистентность, которая в этом случае составляет 0,4-0,6 % при норме 0,32-0,44. Сферическая форма может быть наследственно обусловлена.

Кроме того, она наблюдается у клеток, которые завершают свой жизненный цикл.

Вывод

Таким образом, можно сделать вывод о том, что более резистентные – это молодые красные тельца, появляющиеся в крови после выхода из костного мозга и имеющие небольшой индекс сферичности.

Источник: https://icvtormet.ru/krov/osmoticheskaya-rezistentnost-eritrocitov

Что характеризует осмотическая резистентность эритроцитов? Осмотическая резистентность эритроцитов: норма и патологии

Кривая осмотической устойчивости эритроцитов

Для определения осмотической резистентности эритроцитов проводят наблюдения за реакцией крови и раствора хлористого натрия. Эти ингредиенты смешивают в равных пропорциях.

Если концентрация раствора хлорида натрия равна 0,85%, то его называют изотоническим (или физраствором). При более низком содержании соли химикат называют гипотоническим, а при более высоком – гипертоническим. В изотоническом растворе эритроциты не разрушаются, в гипотоническом – набухают и распадаются, а в гипертоническом – сжимаются и погибают.

Если концентрация раствора хлорида натрия равна 0,85%, то его называют изотоническим (или физраствором). При более низком содержании соли химикат называют гипотоническим, а при более высоком — гипертоническим. В изотоническом растворе эритроциты не разрушаются, в гипотоническом — набухают и распадаются, а в гипертоническом — сжимаются и погибают.

Как проводят анализ

Метод определения осмотической резистентности эритроцитов связан с использованием гипотонических растворов концентрацией от 0,22 до 0,7%. В них помещают одинаковое количество крови.

Эту смесь держат около часа при комнатной температуре, а затем подвергают обработке в центрифуге. При этом наблюдают за цветом жидкости.

В начале процесса распада эритроцитов смесь становится слегка розовой, а при полном разрушении кровяных клеток — красной.

Таким образом, при определении осмотической резистентности эритроцитов получают 2 показателя: минимальный и максимальный.

Этот анализ помогает определить причину анемии. Кровь у пациента берут из вены. Специальной подготовки или соблюдения диеты перед анализом не требуется.

Чтобы провести пробы на осмотическую резистентность эритроцитов, в пробирки помещают гипотонический раствор NaCl разной концентрации (от 0,7 % до 0,22%). В каждую пробирку добавляют одинаковое количество крови, как правило – 0, 02 мл.

В течение часа держат при комнатной температуре, после чего центрифугируют и по цвету раствора определяют начало разрушения эритроцитов и полный гемолиз. Если раствор слегка порозовел, это говорит о начале разрушения.

При полном распаде раствор приобретает ярко-красный цвет.

В результате получают два параметра – максимальную и минимальную резистентность, которая выражается в процентах.

Советуем прочитать:Сколько живут эритроциты?

Метод определения осмотической резистентности эритроцитов связан с использованием гипотонических растворов концентрацией от 0,22 до 0,7%. В них помещают одинаковое количество крови.

Эту смесь держат около часа при комнатной температуре, а затем подвергают обработке в центрифуге. При этом наблюдают за цветом жидкости.

В начале процесса распада эритроцитов смесь становится слегка розовой, а при полном разрушении кровяных клеток – красной.

Границы нормы

При исследовании проводят определение границ осмотической резистентности эритроцитов. Превышение или снижение этих показателей может означать патологию.

Верхняя граница ОРЭ в норме составляет не более 0,32%. Если резистентность становится меньше этого показателя, то это может свидетельствовать о следующих патологиях:

  • гемоглобинопатия;
  • желтуха застойного типа;
  • операция удаления селезенки;
  • талассемия;
  • полицитемия;
  • сильная потеря крови.

Если нижняя граница осмотической резистентности эритроцитов становится больше 0,48%, то это может быть при разных видах гемолитической анемии и после отравления свинцовыми соединениями.

При некоторых видах патологий крови границы ОРЭ могут расширяться. Так происходит при анемии, связанной с авитаминозом В12 и разрушении эритроцитов при остром гемолитическом кризе.

Форма и зрелость красных клеток крови

Осмотическая резистентность эритроцитов зависит от формы этих клеток. Резистентность значительно ниже у красных кровяных телец, имеющих выраженную сферическую или шарообразную форму. Такие клетки очень подвержены разрушению под воздействием различных факторов. Форма эритроцитов может быть наследственно обусловлена или являться следствием их старения.

На устойчивость эритроцитов влияет также их возраст. Самая высокая резистентность выявляется у молодых клеток, имеющих плоскую форму.

Электронный научный журнал Современные проблемы науки и образования ISSN 2070-7428

Кривая осмотической устойчивости эритроцитов
1 Аль-Рабии М.А.М. 1Чалабов Ш.И. 1Астаева М.Д. 1Кличханов Н.К. 1 1 ФГБОУ ВПО «Дагестанский государственный университет» Изучено влияние умеренной гипотермии разной длительности на осмотическую хрупкость эритроцитов и содержание SH-групп в общих белках мембран и в белке полосы 3 эритроцитов крыс.

Температуру тела крыс за 30 мин снижали до 30°С путем наружного охлаждения, а затем пролонгировали гипотермию в течение 90 и 180 мин. Анализ полученных данных показывает, что в динамике гипотермии наблюдаются обратимые изменения как осмотической хрупкости эритроцитов, так и содержания тиоловых групп в белках мембран.

Сразу после снижения температуры тела и через 90 мин гипотермии осмотическая хрупкость эритроцитов повышается, а через 180 мин гипотермии возвращается к контрольному уровню. SH-групп в общих белках мембран эритроцитов и в белке полосы 3 через 90 мин гипотермии достоверно снижается (на 16,4 и 28,8%, соответственно), а через 180 мин гипотермии повышается до контрольного уровня.

В динамике гипотермии обнаружена корреляция (r = -0.950) между изменением осмотической хрупкости эритроцитов и уровнем тиоловых групп в белках мембран. Полученные данные свидетельствуют о том, что у гомойотермных организмов при длительной умеренной гипотермии могут включиться механизмы адаптивных перестроек метаболических процессов на уровне эритроцитов. 1. Кличханов Н.К., Исмаилова Ж.Г.

, Астаева М.Д. Свободнорадикальные процессы в биологических системах. Учебное пособие. – Махачкала: Издательство ДГУ, 2012. – 188 с.
2. Ломако В.В, Коваленко И.Ф., Шило А.В. Эритроциты периферической крови при разных вариантах гипотермии гомойотермного организма // Проблемы криобиологии. – 2012. – Т. 22, №4. – С. 398-409.
3. Маяхи Мохаммед Т. Джабер, Исмаилова Ж.Г., Астаева М.Д., Кличханов Н.К.

Интенсивность свободнорадикальных процессов в крови крыс при гипотермии // Вестн. Дагестанского науч. центра РАН. – 2012. – №. 45. – С. 44-49. 4. Чалабов Ш.И., Аль Рабии М.А., Койсултанова З.К., Муртазаева А.З., Кличханов Н.К. Морфологические характеристики эритроцитов крыс при умеренной гипотермии // Матер. Всеросс. науч.-практич. конф. с междунар.

участием, посвященной 50-летию биологического факультета ДГУ «Закономерности распространения, воспроизведения и адаптаций растений и животных» (Махачкала, сент. 2014). – Махачкала, 2014. – С. 203-204.
5. Эмирбеков Э.З., Кличханов Н.К. Свободнорадикальные процессы и состояние мембран при гипотермии. – Ростов-н/Д.: Изд-во Южного федерального ун-та, 2011. – 200 с. 6. Campanella M. E., Chu H.

, Low P. S. Assembly and regulation of a glycolytic enzyme complex on the human erythrocyte membrane // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2005. Vol. 102. – P. 72402-72407.
7. Deuticke B. The role of membrane sulfhydryls in passive, mediated transport processes and for the barrier function of the erythrocyte membrane // Membr. Biochem. – 1986. Vol. 6. – P. 309-326.
8. Habeeb A. F. S. A.

Reaction of protein sulfhydryl groups with Ellman’s reagent // Meth. Enzymol. – 1972. Vol. 34. – P. 457-464.
9. LoConte, M.; Carroll, K. S. The chemistry of thiol oxidation and detection / Oxidative stress and redox regulation. Jakob, U. Ed. New York: Springer 2012, Chapter 1. P. 1-42.
10. Pandey K. B., Rizvi S. I.

Markers of oxidative stress in erythrocytes and plasma during aging in humans // Oxidative Med. and Cell. Longevity. – 2010. Vol. 3, Is.1. – P. 2-12.
11. Polderman K. H. Application of therapeutic hypothermia in the ICU: opportunities and pitfalls of a promising treatment modality. Part 1: Indications and evidence // Intensive Care Med. –2004. Vol. 30. – P. 556-575.
12. Sato Y., Yamakose H.

, Suzuki Y. Participation of band 3 in hypotonic hemolysis of human erythrocytes // Biol. Phar. Bull. – 1993. Vol. 16, N2. – P. 188-194.
13. Srour M. A., Bilto Y.Y., Juma M., Irhimch M.R. Exposure of human erythrocytes to oxygen radicals causes loss of deformability, increased osmotic fragility, lipid peroxidation and protein degradation // Clinical Hemorheol. Microcircul. – 2000. Vol. 23. – P.

13-21.
14. Wang X., Wu Z., Song G., Wang H., Long M., Cai S. Effects of oxidative damage of membrane protein thiol groups on erythrocyte membrane viscoelasticities // Clin. Hemorheol. Microcirc. – 1999. Vol. 21(2). P. 137-146.
15. Xia J., Browning J. D., O’Dell B. L.

Decreased plasma membrane thiol concentration is associated with increased osmotic fragility of erythrocytes in zinc-deficient rats // J. Nutr. 1999. Vol. 29. P. 814-819.

Искусственные гипотермические состояния широко используются в клинической практике. Наиболее часто гипотермию применяют для защиты мозга и сердца от последствий ишемии и инсульта [11].

В этом плане наиболее эффективной оказалась умеренная (30-34ºС) гипотермия. Наши исследования показали, что у крыс кратковременная умеренная гипотермия (30ºС) без анестезии (аналог непреднамеренной гипотермии) способствует развитию холодового стресса и активации свободнорадикальных процессов в крови [5].

В условиях in vivo циркулирующие эритроциты постоянно испытывают влияние активных форм кислорода (АФК), образующихся как в самой клетке, так и в плазме крови [10]. Внутри эритроцитов аутоокисление гемоглобина в метгемоглобин приводит к образованию супероксидного анион-радикала. Источниками внеклеточных АФК служат гранулоциты, макрофаги, другие метаболически активные клетки крови, клетки эндотелия сосудов, которые образуют пероксид водорода и супероксид анион-радикал. Окислительные модификации белков и липидов мембраны могут привести к существенному изменению структурно-функциональных свойств эритроцитов.

Недавно показано [2], что независимо от глубины (ректальную температуру снижали до 32,5°С, 27,5°С и 16,5°С) и способа достижения гипотермии (краниоцеребральная, общая и общая в условиях гипоксии-гиперкапнии) у крыс наблюдается повышение осмотической хрупкости эритроцитов и усиливается их гемолиз.

В то же время неизвестно, как изменяется осмотическая стойкость эритроцитов от длительности умеренной гипотермии. Данные научной литературы свидетельствуют о том, что степень осмотической резистентности эритроцитов зависит от концентрации тиоловых групп в белках мембран, особенно, белке полосы 3 [15].

Целью данной работы явилось изучение зависимости осмотической резистентности эритроцитов крыс и концентрации SH-групп белков их мембраны от длительности умеренной гипотермии.

Методы исследования

Опыты проведены на половозрелых лабораторных белых крысах-самцах массой 180-200 г. Для снижения температуры тела крыс помещали в пеналы из плексигласа, в рубашке которых циркулировала холодная вода. Температуру тела крыс снижали в течение 30 мин.

до 30°С (кратковременная умеренная гипотермия), а в следующих сериях экспериментов эту температуру тела поддерживали в течение 90 и 180 мин. (пролонгированная умеренная гипотермия). После декапитации животного собирали кровь в пробирку с гепарином (50 ед/мл).

Эритроциты осаждали центрифугированием при 2000 об/мин в течение 10 мин., а затем трижды промывали физиологическим раствором при 4°С. Отмытые эритроциты гемолизировали в 10 мМ трис-HCl буфере рН 7,4, содержащем 1,5 мМ ЭДТА [1].

Тени эритроцитов осаждали при 20000 g в течение 20 мин при 4°С, а затем пятикратно отмывали 10 мМ трис-HCl буфером рН 8,2. Белые тени эритроцитов хранили при -70°С до использования.

Белок полосы 3 из теней эритроцитов экстрагировали 9 объемами 0,1 моль/л NaOH в течение 30 мин при 4°С [15]. Нерастворимую фракцию, содержащую белок полосы 3, собирали путем центрифугирования при 56000g в течение 30 мин при 4°С.

SH-групп в общих белках мембран эритроцитов и в белке полосы 3 измеряли колориметрическим методом как описано [8]. К 1,5 мл буфера рН 8,0 (0,08 моль/л фосфата натрия, 0,5 мг/мл Na2-ЭДТА и 2% додецилсульфата натрия) добавляли 0,2 мл суспензии мембран, содержащей 120 мкг белка.

После перемешивания добавляли 0,1 мл 5,5'-дитио-бис (2-нитробензойной кислоты) (DTNB; 20 мг в 10 мл 0,1 моль/л натрий-фосфатного буфера рН 8,0). Через 15 мин измеряли поглощение при 412 нм, используя эквивалентную концентрацию белка в качестве контроля.

Концентрацию SH-групп рассчитывали, используя молярный коэффициент поглощения, равный 13600 (моль/л)-1 см-1. Белок в мембранах определяли методом Лоури.

Осмотическую резистентность эритроцитов определяли по устойчивости клеток к гипотоническим растворам натрия хлорида.

25 мкл эритроцитов добавляли в серии пробирок, содержащих 2,5 мл растворов с различными концентрациями NaCl (от нуля до 0,9 г/100 мл в 5 ммоль/л фосфатного буфера, рН 7,4) с шагом 0,05 г/100 мл. Пробы инкубировали при 37°C в течение 30 минут.

Гемолиз останавливали путем добавления равного объема растворов соответствующих концентраций хлорида натрия, необходимых для восстановления изотоничности. Пробы центрифугировали при 3000 g в течение 10 минут.

Оптическую плотность супернатанта определяли при 540 нм (максимум поглощения гемоглобина) против дистиллированной воды при толщине слоя раствора 1 см, используя спектрофотометр СФ-46. Процент гемолиза эритроцитов (X) рассчитывали относительно первой пробы, где отсутствовал NaCl (100% гемолиз) по формуле:

X=(Eо/Emax)·100,

где Ео – экстинкция исследуемой пробы, Еmax – экстинкция, соответствующая 100% гемолизу, X – процент гемолиза.

Для количественной оценки осмотической резистентности эритроцитов использовали величину осмотичности, соответствующую гемолизу 50% клеток (С50), – центр распределения эритроцитов по осмотической резистентности.

Данные в таблице приведены в виде среднее ± ошибка среднего. Достоверность различий определяли с помощью t-критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение

Результаты наших исследований показали, что при гипотермии осмотическая резистентность эритроцитов изменяется. При этом степень изменений зависела от длительности гипотермии. При кратковременной гипотермии осмотическая хрупкость эритроцитов возрастает (рисунок).

При этом наблюдается не только сдвиг эритрограммы вправо, но даже в изотонических условиях происходит 10% гемолиз эритроцитов. Наибольшее и достоверное снижение осмотической резистентности эритроцитов происходит через 90 мин гипотермии.

Об этом свидетельствует не только правый сдвиг кривой гемолиза на эритрограмме, но и достоверное повышение значения осмотичности, соответствующее лизису 50% клеток С50 (табл. 1). Как видно (рисунок, табл.

1), через 180 мин гипотермии осмотическая резистентность эритроцитов повышается до уровня контроля.

Осмотическая резистентность эритроцитов крыс при гипотермии

Таблица 1

Величина осмотичности, соответствующая гемолизу 50% клеток (С50) при гипотермии (M±m; n = 8)

Состояние животногоС50, %
Контроль0,431±0,091
Гипотермия 30 мин сразу0,460±0,018
Гипотермия 30°С через 90 мин0,481±0,012Р

Источник: https://science-education.ru/ru/article/view?id=17364

Серповидные эритроциты в крови

В норме проба на серповидностьэритроцитов отрицательная.

Пробуприменяют для диагностики гемоглобинопатии.Гемоглобин Sпри понижении парциальногодавления кислорода кристаллизуется вформе тактоидов и придает эритроцитамформу серпа. Среди гемоглобинопатиичаще всего встречается серповидно-клеточнаяанемия, поэтомувыявление эритроцитов в виде серпапозволяет установить этот вид анемии.

Эритроцитометрия

Эритроцитометрия— измерение диаметра эритроцитов. Впроцентном отношении диа­метрыэритроцитов у здоровых людей распределяютсяследующим образом: 5 мкм — 0,4 % всехэритроцитов; 6 мкм — 4 %; 7 мкм — 39 %; 8 мкм— 54 %; 9 мкм — 2,5 %.

Графическое изображениесоотношения содержания в крови эритроцитовс различными диаметрами на­зываютэритроцитометрической кривой Прайс-Джонса,где по оси абсцисс откладывают ве­личинудиаметра эритроцитов (мкм), а по осиординат — проценты эритроцитовсоответст­вующейвеличины.

В норме эритроцитометрическаякривая имеет правильную, с довольноузкимоснованием, почти симметричную форму(рис. 1.1).

Результатыэритроцитометрии важны для уточненияхарактера анемии. При железоде-фицитнойанемии, как правило, возможны микроцитозэритроцитов до 30—50 % всех эрит­роцитови соответственно сдвиг эритроцитометрическойкривой влево.

Увеличение процен­тамикроцитов наблюдается также принаследственном микросфероцитозе,талассемии, свинцовомотравлении.

При микроцитозе и сфероцитозеэритроцитометрическая кривая растянутаи неправильна, сдвинута влево, в сторонуменьших диаметров.

Увеличениечисла макроцитов является признакоммакроцитарной анемии, наблюдаю­щейсяпри В,2-дефицитныхи фолиеводефицитных состояниях, прикоторых их содержание можетдостигать 50 % и более, при этом в небольшомчисле (1—3 %) находят и мегалоциты(эритроцитыс диаметром 12 мкм и более). При этихформах анемии эритроцитометрическаякривая имеет неправильную пологую формус широким основанием и сдвинута вправо,т.е. в сторонубольших диаметров. Макроцитоз эритроцитовможет наблюдаться независимо от анемиипри алкоголизме, диффузных пораженияхпечени.

40

+■

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Рис. 1.1. Эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса в норме.

Гистограмма распределения эритроцитов по объему, получаемая с помощью современ­ных гематологических анализаторов, по сравнению с такой же по диаметру (кривая Прайс-Джонса) имеет ряд особенностей [Титов В.Н., Наумова И.Н., 1995]. Коэффициент вариации в 3 раза выше при определении объема, чем при определении диаметра.

Если кривая распре­деления диаметров эритроцитов симметрична, то распределение клеток по объему будет иметь сдвиг вправо, пропорционально коэффициенту вариации.

Если кривая распределения диаметров полимодальна (имеет несколько пиков), то гистограмма распределения эритроци­тов по объему может оказаться унимодальной (одновариантной), что является недостатком автоматизированного метода.

Источник: https://studfile.net/preview/6795089/page:17/

Осмотическая резистентность эритроцитов: нормы и отклонения

Кривая осмотической устойчивости эритроцитов

Красные кровяные тельца (или эритроциты) — наиболее многочисленные клетки крови. Особое устройство мембраны позволяет им захватывать молекулы кислорода в капиллярах легких и транспортировать его к тканям и органам.

Однако при определенных патологиях структура оболочки эритроцитов становится менее устойчивой и легко разрушается.

Такие изменения приводят к значительному уменьшению количества красных телец в крови и последующему нарушению кислородного обмена в тканях организма.

Способность мембран красных клеток крови противостоять разрушению под воздействием неблагоприятных факторов получила название резистентность. Особое значение при диагностике заболеваний имеет осмотическая резистентность (ОРЭ) — сохранение устойчивости оболочки клетки в условиях изменения концентрации растворенных солей в окружающей ее среде.

Методика измерения осмотической резистентности

Тест на определение резистентности эритроцитов

Клетки крови способны нормально функционировать в изотоническом растворе (содержание ионов NaCl не превышает 0,85%). Такая концентрация NaCl соответствует количеству ионов соли в сыворотке крови. Те растворы, которые содержат большее количество солей, называются гипертоническими, а меньшее — гипотонические. Мембраны клеток, помещенных в такие растворы, быстро разрушаются.

Эритроциты здорового человека способны выдерживать изменения осмотического давления, то есть обладать прочной оболочкой. Для определения стойкости мембран клеток крови используют следующую методику:

  1. В пробирки помещается раствор NaCl c разной степенью концентрации (начиная от самой большой — 0,7%, до наименьшей — 0,22%);
  2. В каждую пробирку добавляется небольшое количество крови (не более 0,02 мл);
  3. В течение следующего часа пробирки держат при температуре в 22-23°C;
  4. Полученные растворы центрифугируют и по цвету содержимого высчитывают примерное время начала разрушения клеток крови и момент их полного гемолиза;

Чуть розовый раствор свидетельствует о том, что эритроциты только начали разрушаться, тогда как ярко-красный цвет — знак того, что произошел полный распад клеток.

При помощи этого анализа определяют минимальную и максимальную осмотическую резистентность кровяных телец. Максимальная соответствует тому значению содержания NaCl, при котором происходит полное разрушение клеток крови. Минимальная же определяется тем количеством, при котором клетки разрушаются меньше всего.

Подготовка к процедуре. Нормальные значения резистентности

Пробирка с антикоагулянтом — важный момент при определении резистентности

Расчет значений осмотической резистентности позволит определить причину нехватки эритроцитов в крови пациента. Для проведения анализа кровь берется из вены и сразу же помещается в пробирку с антикоагулянтом, чтобы избежать ее свертывания. В каких-либо особых приготовлениях перед сдачей анализа нет необходимости — пациент может не менять привычный ему режим питания.

Для взрослого человека нормальными показателями являются следующие значения:

  • минимальная резистентность — не выше 0,48%;
  • максимальная — не ниже 0,32%

Следует помнить, что у маленьких детей показатели устойчивости значительно выше, чем у взрослых пациентов, в то время как у пожилых — немного ниже нормы.

Гемолиз крови, вызванный патогенными микроорганизмами

Существует несколько факторов, которые могут повлиять на достоверность данных анализа:

  • недавнее переливание крови;
  • присутствие во взятом образце патогенных микроорганизмов, которые вызывают гемолиз клеток;
  • некоторые заболевания, при которых количество зрелых эритроцитов в крови минимально (тяжелые формы анемии);
  • наконец, человеческий фактор — неосторожное обращение с наполненными пробирками может привезти к преждевременному гемолизу;

Если вышеперечисленные причины отсутствовали, а результат анализа выходит за пределы нормы, то можно говорить о серьезном заболевании, за которым последуют значительные нарушения обмена веществ в организме.

Отклонения от стандартных показателей

Талассемия как причина снижения резистентности

ОРЭ менее 0,33% развивается в следующих ситуациях:

  • значительные кровопотери;
  • при талассемии (наследуемое заболевание, при котором нарушен синтез белков, входящих в состав гемоглобина);
  • при спленэктомии (удалении части селезенки — органа, активно участвующем в процессах кроветворения);
  • при полицитемии (нарушение функций кроветворных клеток костного мозга);

Резистентность более 0,48% связана с такими заболеваниями как:

  • наследственная гемолитическая анемия (передающаяся по наследству патология, при которой организм активно разрушает свои же клетки крови);
  • гемолитическая анемия новорожденных (диагностируется в течение первых дней жизни младенца. Может быть как наследственной, так и приобретенной);
  • отравление солями тяжелых металлов;

Как правило, отклонения от нормальных показателей резистентности сигнализируют о сбоях в работе организма, причем чаще всего диагностируемые патологии носят наследственный характер.

Предотвращение снижения ОРЭ

Консультация генетика для профилактики наследственной патологии

Как правило, причиной снижения резистентности клеток становятся наследственные заболевания.

Пациенты, столкнувшиеся с такой проблемой, могут обратиться к генетику, чтобы рассчитать возможность появления такого же заболевания у их детей.

В остальных случаях профилактика снижения плотности мембраны клеток крови сводится к ведению здорового образа жизни, отсутствию вредных привычек, созданию наиболее благоприятных условий для процесса кроветворения.

Признаки снижения резистентности клеток крови

Снижение аппетита — один из симптомов заболевания

Еще до проведения анализа, пациент может найти у себя признаки снижения устойчивости мембран кровяных телец. Вот основные проявления подобного отклонения:

  • Сонливость;
  • Угнетенное состояние;
  • Значительное снижение массы тела;
  • Анемичность слизистых оболочек;
  • Повышенная температура тела;
  • Отсутствие интереса к еде;

Перечисленные симптомы должны стать серьезным поводом для беспокойства. При их обнаружении следует немедленно записаться на прием к врачу и пройти полное обследование. Чем раньше будет поставлен диагноз, тем быстрее можно будет начать лечение и тем меньший вред будет нанесен организму.

Зависимость устойчивости мембраны от формы кровяных телец и их возрастных изменений

Серповидноклеточные эритроциты с низкой плотностью мембраны

Плотность мембраны зависит не только от возраста клеток, но и от их формы. Сформировавшийся эритроцит приобретает вид двояковогнутого диска, однако также могут встречаться и дегенеративные формы эритроцитов: сферические, звездчатые, полулунные, серповидные и т.д.

Для разных заболеваний характерны свои изменения клеток крови.

К примеру, при серповидно-клеточной анемии развиваются серповидные эритроциты, талассемия характеризуется появлением овальных клеток, большинство видов анемий проявляют себя появлением сфероцитов — эритроцитов сферической формы.

Нормальную устойчивость мембраны имеют лишь эритроциты в форме двояковогнутого диска. Красные клетки крови другой конфигурации менее жизнеспособны — их резистентность составляет 0,4-0,6% при обычных показателях в 0,32-0,48%.

Кроме того, такие клетки, как правило, не способны качественно выполнять свои функции. Из патологических форм чаще всего встречаются овальные эритроциты.

Такие клетки можно наблюдать не только при болезнях крови, но и у полностью здоровых людей, поскольку, чем старше становятся эритроциты, тем более округлыми они становятся.

Двояковогнутый диск — наиболее устойчивая форма эритроцита

Таким образом, наиболее устойчивыми клетками являются молодые, недавно сформировавшиеся эритроциты, отличающиеся наиболее выраженной дисковидной формой.

Методика расчета осмотической устойчивости нередко применяется при обнаружении гемоглобинопатии и прочих заболеваний крови и отличается эффективностью и простотой. Наиболее часто его применяют для обнаружения гемолитической анемии и онкогематологии (в том числе и у новорожденных).

Источник: https://gidanaliz.ru/analiz/osmoticheskaya-rezistentnost-eritrocitov.html

Доктор Дмитриев
Добавить комментарий